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動物雄性成年C57BL/6小鼠（8-16周齡；體重約20g）；造模在50ml塑料管上開幾個孔以保持氣流，將動物置于這樣的塑料管中，從而使動物暴露于慢性束縛應激中。實驗從上午11:00開始，每天4-8小時，整個過程持續14天，而對照組則在同一時間無束縛地剝奪食物和水。在慢性束縛的最后一天測量每只小鼠的體重。模型評估1.蔗糖偏好試驗小鼠單獨飼養，無任何應激條件下，給予1%蔗糖溶液和水2天；1%蔗糖溶液和水的瓶子位置在24小時切換。之后，小鼠被剝奪食物和水12小時；在黑暗環境下，同...
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戊四氮（Pentylenetetrazole，PTZ）是一種高度敏感的化合物，有毒物質；小心處理。1.將2mg/mLPTZ溶解在無菌0.9%（w/v）NaCl中。在使用當天準備PTZ。2.對于野生型C57BL/6小鼠，試驗建議劑量為30-35mg/kg。對PTZ的敏感性取決于使用的小鼠品系，注射劑量因實驗目的而異。3.服用PTZ后觀察動物行為30分鐘，并對異常行為進行分類和評分。如果可能，觀察動物24小時，或注射后至少再觀察6-10小時，特別是在癲癇發作嚴重時得分達到3分或以...
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背景：顱腦外傷（TBI）是世界范圍內威脅生命的疾病。大多數中國人由于運動受傷，辦公室或家中意外摔倒以及摩托車受傷而患有TBI。由于社會對疾病的了解不多，因此TBI被稱為“沉默流行病”。TBI后繼發性腦損傷引起病理，生理和生物學反應，導致腦功能障礙。生物和化學過程通常觸發連鎖反應，可導致炎癥細胞，能量缺乏，興奮性毒性，細胞凋亡和氧化應激。氧化應激在上述過程中起重要作用。氧化會增強炎癥和其他反應，因此促進炎癥和其他反應會加劇氧化應激并形成惡性循環。氧化應激在TBI后一小時發生，并...
2-25
目的：理解低氧預處置對子宮內膜異位癥大鼠模型異位病灶構成的影響，藉此進一步說明EMs發作開展的分子機制，從而為其防治供新思緒。辦法：Lewis雌性大鼠隨機分為兩組，分別給予HPC（8%O2）和常壓常氧（21%O2）處置8h，隨即取其子宮組織移植至正常大鼠腹壁。術后14d記載移植灶體積，并采用ELISA、免疫組化、Westernblot、RT-PCR和Tunnel法，對血清和腹腔液以及移植前子宮組織和移植病灶停止檢測。結果：HPC可顯著上調大鼠子宮血管內皮生長因子（VEGF）m...
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一、原理培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好，所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞，總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力，由組織中分離細胞一般也要檢查活力，以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用。復蘇后的細胞也要檢查活力，了解凍存和復蘇的效果。用臺盼蘭染細胞，死細胞著色，活細胞不著色，從而可以區分死細胞與活細胞。利用細胞內某些酶與特定的試劑發生顯色反應，也可測定細胞相對數...
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材料：6孔板marker筆直尺20微升槍頭（滅菌）無血清培養基PBS準備：所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內）流程：1、先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻地劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2、在空中加入約5X105個細胞，具體數量因細胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿。3、第二天用槍頭比著直尺，盡量垂直于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不要傾斜。4、用PBS洗細胞3次，去除劃下的細胞，加入...
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初代培養或原代培養，是從供體獲取組織后的培養。組織和細胞剛剛離體，生物性狀尚未發生很大的變化，具有二倍體遺傳性狀，在供體來源充分、生物條件穩定的情況下（年齡、性別），在一定程度上能反映體內狀態。實驗方法原理消化培養法合成培養基胰蛋白酶消化培養法，能把組織塊分散成細胞團或單個細胞，便于細胞從培養液中攝取營養和排出代謝產物，細胞能較快地長成單層。本法尤適用于培養大量組織，細胞產量高；但用于經常性小量培養工作稍顯繁瑣，無菌操作不良時且易污染。實驗材料組織試劑、試劑盒Hanks培養液...
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